細胞培養(yǎng)板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型);培養(yǎng)孔的孔數(shù)有6、12、24、48、96、384、1536 孔等;根據(jù)材質的不同有Terasaki板和普通細胞培養(yǎng)板。具體選擇時根據(jù)培養(yǎng)細胞的類型、所需培養(yǎng)體積及不同的實驗目的而定。
(1)平底和圓底(U型和V型)培養(yǎng)板的區(qū)別和選擇
不同形狀的培養(yǎng)板有不同用途。培養(yǎng)細胞,通常是選用平底的,這樣便于鏡下觀測、有明確的底面積、細胞培養(yǎng)液面高度相對一致。因此做MTT等實驗時,無論是貼壁和懸浮細胞,一般選用平底板。測吸光值一定要使用平底的培養(yǎng)板。要特別注意材質, 標示"Tissue Culture (TC) Treated"是養(yǎng)細胞用的。
U型或V型板,一般在某些特殊要求時才使用。如在**學方面,當做兩種不同**細胞混合培養(yǎng)時,需要二者相互接觸刺激,這時一般會選用U型板,因為細胞會由于重力的作用而聚集在很小的范圍內內。圓底培養(yǎng)板還會用于同位素摻入的實驗,需要用細胞收集儀收集細胞的培養(yǎng),如"混合**細胞培養(yǎng)"等。V型板常用做細胞殺傷、**學血凝集實驗。細胞殺傷這種實驗也可用U型板替代(加入細胞后,低速離心)。
(2)Terasaki板和普通細胞培養(yǎng)板的區(qū)別
Terasaki plate主要是用于晶體學研究,產(chǎn)品設計便于對晶體的觀察與結構分析。有兩種sitting 和handing drop兩種方法,兩種方法應用產(chǎn)品的外形結構也不同。材料上選擇crystal class polymer ,特殊的材料有利觀察晶體結構。
細胞培養(yǎng)板主要是PS材料,材料是treated sufface,便于細胞貼壁生長與伸展。當然還有浮游細胞的生長材料,同時還有l(wèi)ow binding surface
(3)細胞培養(yǎng)板與酶標板的區(qū)別
酶標板一般要比細胞培養(yǎng)板貴,細胞板主要做細胞培養(yǎng),也可以用來測蛋白濃度;酶標板包括包被板和反應板,一般不用做細胞培養(yǎng),它主要做**酶聯(lián)反應后的蛋白檢測,需要更高的要求和特定的酶標工作液。
(4)常用不同培養(yǎng)板的孔底面積及推薦加液量
不同孔板所加培養(yǎng)液的液面都不宜太深,一般在2~3mm范圍,結合不同孔的底面積就可算出各培養(yǎng)孔的適宜加液量(參考下表)。若加液量過多會影響氣體(氧氣)交換,而且在搬動過程中易溢出造成污染。具體所加細胞密度依實驗的目的不同靈活掌握。
常用的培養(yǎng)器皿
培養(yǎng)器皿
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底面積(cm2)
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加培養(yǎng)液量(mL)
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可獲細胞量
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96孔培養(yǎng)板
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0.32
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0.1
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105
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24孔培養(yǎng)板
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2
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1.0
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5×105
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12孔培養(yǎng)板
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4.5
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2.0
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106
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6孔培養(yǎng)板
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9.6
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2.5
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2.5×106
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4孔培養(yǎng)板
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28
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5.0
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7×106
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3.5cm培養(yǎng)皿
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8
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3.0
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2.0×106
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6cm培養(yǎng)皿
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21
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5.0
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5.2×106
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9cm培養(yǎng)皿
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49
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10.0
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12.2×106
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10cm培養(yǎng)皿
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55
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10.0
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13.7×106
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25cm塑料培養(yǎng)瓶
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25
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5.0
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5×106
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75cm塑料培養(yǎng)瓶
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75
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15~30
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2×107
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25cm玻璃培養(yǎng)瓶
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19
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4.0
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3×106
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100cm玻璃培養(yǎng)瓶
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37.5
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10.0
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6×106
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250cm玻璃培養(yǎng)瓶
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78
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15.0
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2×107
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2500cm旋轉培養(yǎng)瓶
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700
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100~250
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2.5×108
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注:各種單層生長的細胞在培養(yǎng)皿中長滿的細胞數(shù),主要取決于器皿底表面積和細胞體積的大小。上表以Hela細胞為例給出的可獲細胞量僅作參考。
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